隨著高效液相色譜儀（HPLC）的快速發展，越來越多的化妝品企業都配置有一定數量的HPLC。無論是原料鑒別、質控，抑或是限、禁用物質的定性定量檢測，都發揮著至關重要的作用。

本期我們來了解HPLC重要的核心之一：色譜之眼——檢測器。

檢測器的作用

Function of detector

隨時間推移，樣品組分在經過色譜柱有效分離后，在經過檢測器時，會產生特定的信號，檢測器將之轉換、放大為可供檢測的信號，由數據記錄系統記錄下來，形成色譜圖，從而定性、定量分析待測組分。毫不夸張地說，沒有檢測器，HPLC就是一個“瞎子”，任何物質從其面前經過，也只能熟視無睹。

不同的檢測器其使用范圍有所不同，因此需要掌握不同檢測器的原理。

液相色譜常用的檢測器包括：紫外檢測器（UVD或DAD/PDA/PDAD）、熒光檢測器（FLD）、示差折光檢測器（RID）、蒸發光散射檢測器（ELSD）、質譜檢測器（MSD）等。

紫外檢測器

UV detector

是目前液相色譜中應用最廣泛的檢測器。自然界中大部分有機物和部分無機物都具有紫外吸收能力，紫外檢測器根據化合物對紫外光的吸收能力，從而進行分析。現在經常能聽到的紫外檢測器（UVD）、光電二極管陣列檢測器（DAD，也稱PDA、PDAD），都是基于這個原理。

它有兩個流通池，一個參比，一個測量。光源發出的紫外光照射到流通池上，若兩個流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等，無信號輸出；當組分進入測量池時，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關。

許多紫外檢測器光源采用的是氘燈，使用范圍一般是190-800nm，開發方法時，需要考慮化合物的最大吸收波長，同時應避開流動相的吸收干擾來選擇合適的檢測波長。

熒光檢測器

Fluorescence detector

適用于能激發熒光的化合物。很多與生命科學有關的物質，如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測。熒光檢測器在生物樣品痕量分析中具有重要作用。

但由于自然界中，能夠產生熒光的物質較少，相當一部分物質需要進行熒光衍生后，才可以進行檢測（如微量的肽和氨基酸）。樣品的局限導致其應用受限，但FLD靈敏度極高，讓其在檢測方面發揮著至關重要的作用。

示差折光檢測器

Differential refractometer

通用型檢測器，利用物質的折光效應，對所有物質均有響應，只要被測組分與洗脫液的折光指數有差別就可使用。各類糖類化合物、脂肪烷烴等，因沒有紫外吸收，一般常用示差折光檢測器。

它的通用性比UVD廣，但靈敏度要低。與FLD相似，RID也有“短板”——對溫度變化敏感，是所有檢測器中對溫度要求最高的，同時還不能采用梯度洗脫。因為任何使流動相比例發生改變的因素，都會引起基線的持續變化且難以平衡，這也限制了RID的使用。

蒸發光散射檢測器

Evaporative light scattering detector

一種通用型的檢測器，原理是利用光散射效應，可檢測揮發性低于流動相的樣品，通過霧化器去除溶劑，讓化合物形成懸浮顆粒，從而形成散射效應。ELSD靈敏度比RID高，對溫度變化不敏感，基線穩定，可用于梯度洗脫，但不能使用不揮發的鹽類溶劑，而要用醋酸銨之類的揮發性緩沖鹽來代替。目前，ELSD已被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸、藥物以及聚合物等的檢測。

質譜檢測器

Mass spectrometer detector

通用型檢測器，液相色譜-質譜聯用儀（LC-MS）就是應用了MSD，在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結構信息的提供等方面都有突出的優點。但它的昂貴操作費用和復雜性在一定程度上限制了它的推廣應用。

由此可見，作為HPLC核心之一的檢測器，充當著“眼睛”，發揮著極其重要的作用。如果檢測器不合適，再優秀的前處理、柱分離技術，也無法完成檢測任務。

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